<nav id="8m0gg"></nav>
  • <nav id="8m0gg"><strong id="8m0gg"></strong></nav>
  • <nav id="8m0gg"><strong id="8m0gg"></strong></nav>
  • <menu id="8m0gg"></menu>
  • 您好,请登录?
    免费注册??
    会员中心
     购物车
     收藏夹
    客户服务
    首页 技术专栏 产品方案
    报告基因应用之转录后调控
    发布日期:2019/06/04
    点击量:1185

    1.我们可以提供的产品:

    A.载体:

    C8011:psiCHECK-1

    C8021:  psiCHECK-2

    E1330:pmirGLO DUAL-Luciferase miRNA target vector

    B. 体外转录试剂盒

    P1700:T7 RiboMAX Express RNAi system

    C.转染试剂:E2311

    D.检测试剂:E1910,E2920

    E.检测用白板:6005290(纯白板),655098(底透白板)

    2.载体选择

    a.psiCHECK1

    psiCHECK2

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    psiCHECK™ -1 和psiCHECK™ -2 载体用于对RNA干扰(RNAi)的早期优化提供快速的定量方法。此载体可监测与报告基因融合的目的基因表达的变化。两种载体都应用海肾萤光素酶作为主要报告基因,目的基因被克隆至海肾萤光素酶翻译终止密码子下游的多克隆位点。由合成的siRNA 或体内表达的shRNA 引发的针对目的基因的RNAi过程,导致融合mRNA 的剪切和随后的降解。推荐C8011用于检测活细胞中的RNAi效果,使用活细胞底物E6481检测酶活性变化,可以持续检测。C8021含有两个报告基因,用于终点裂解检测。

     

    c. E1330:pmirGLO DUAL-Luciferase miRNA target vector. pmirGLO Vector 被设计用于定量评估miRNA 的活性,这是通过将miRNA 的靶序列插入到萤火虫萤光素酶基因(luc2)的下游或者3` 端实现的。萤火虫萤光素酶作为主要报告基因,其表达减少意味着内源性的或外源引入的miRNA 与克隆的miRNA 的靶序列发生了结合。这一载体是基于Promega 的双报告基因技术,萤火虫萤光素酶基因(luc2 ) 作为主报告基因,用于监控mRNA 的调节,海肾萤光素酶基因(hRluc-neo ) 作为对照报告基因,用于进行归一化处理和阳性筛选。

    3.实验流程

    a.拿到选好的实验载体后普通转化,做菌种保存,中量提取,为后续实验准备好载体。

    b.分子克隆实验:将靶标UTR克隆入选好的载体,转化提取鉴定正确后,中量提取,准备转染实验。

    c. 设置好实验对照,将中量提取好的实验质粒用转染试剂E2311转染到细胞中,转染后24小时将目的siRNA或者miRNA转染到细胞中,24小时后可以开始进行检测。

    d.检测流程:如果选用闪光型试剂E1910,E1960,需要去除培养基,洗涤细胞,加入裂解液,至细胞充分裂解,取20ul裂解产物 进行检测,适合样品数量比较少的客户。如果采用辉光型试剂E2920,E2940,只需将检测试剂加入代检孔,等待30分钟即可开始检测,操作比较简单,适合做高通量的客户。

    Copyright © 2019-2029 上海盛兆生物科技有限公司 沪ICP备19036726号-1_Y
    QQ客服:971909616
    工作日:9:00-22:00
    电话客服:021-54935173
    工作日:9:00-22:00
    咨询客服
    在线岛国片免费观看无码_国产香线蕉手机视频在线观看_中文字幕日韩一级无码视频_FREE性欧美婬妇俄罗斯 <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <蜘蛛词>| <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链> <文本链>